Resistencia a los azoles en cepas de Aspergilus fumigatus sensu stricto aislados de muestras clínicas respiratorias

Introducción. La aspergilosis invasiva presenta alta mortalidad en pacientes con enfermedades crónicas e inmunocomprometidos. Aspergillus fumigatus sensu stricto (AFSS) es el principal agente etiológico y su tipificación requiere de métodos moleculares. La incidencia incrementada de AI resistentes a los antifúngicos demanda un diagnóstico certero y oportuno. Métodos. Se estudiaron 20 cepas de la micoteca del Instituto de Medicina Tropical - Universidad Nacional Mayor de San Marcos, aisladas de muestras respiratorias e identificadas como Aspergillus fumigatus sensu lato mediante el estudio macroscópico y microscópico. Las cepas fueron referidas a la Universidad Nacional del Litoral para su tipificación mediante una PCR screening para AFSS basada en secuencias del gen CYP51A y el estudio de sensibilidad antifúngica para voriconazol (VOR), itraconazol (ITC), posaconazol (POS), isavuconazol (ISA), anidulafungina (ANF), caspofungina (CSF) y anfotericina B (AMB) obteniendo la concentración inhibitoria mínima (CIM) mediante el protocolo de CLSI M38M51S-Ed3. Resultados. Las 20 cepas fueron identificadas como AFSS. Ninguna de las cepas tuvo una CIM por encima del punto de corte clínico (VOR), ni epidemiológico (ITC, ISA, AMB y CSF). POS fue la droga más potente frente a la colección de cepas evaluadas (media geométrica (GM) de CIM de 0,042 µg/ml). Conclusiones. Todos los aislamientos fueron tipificados como AFSS sensibles a los azoles según los puntos de corte clínico, posaconazol tuvo la mayor actividad antifúngica. Nuestros hallazgos aportan a incrementar la escasa información sobre la etiología y sensibilidad a los antifúngicos de uso clínico de las aspergilosis invasiva en nuestro país.

Introduction. Invasive Aspergillosis (IA) poses a significant threat to patients with chronic diseases and compromised immune systems, with Aspergillus fumigatus sensu stricto (AFSS) being the primary etiological agent. Accurate and timely diagnosis is crucial, particularly given the rising incidence of IA strains resistant to antifungals, necessitating molecular methods for typing. Methods. Twenty strains from Instituto de Medicina Tropical - Universidad Nacional Mayor de San Marcos, mycological collection, previously identified as Aspergillus fumigatus sensu lato through macroscopic and microscopic analysis, were studied. These strains were forwarded to the Universidad Nacional del Litoral for AFSS typing using a PCR screening based on CYP51A gene sequences. Antifungal susceptibility testing was performed for Voriconazole (VOR), Itraconazole (ITC), Posaconazole (POS), Isavuconazole (ISA), Anidulafungin (ANF), Caspofungin (CSF), and Amphotericin B (AMB), obtaining Minimum Inhibitory Concentrations (MICs) according to CLSI M38M51S-Ed3. Results. All 20 strains were identified as AFSS. None of the strains exhibited MICs above the clinical breakpoint (VOR) or the epidemiological cutoffs (ITC, ISA, AMB, and CSF). POS demonstrated the highest potency against the strain collection, with a geometric mean MIC of 0,042 µg/ml. Conclusions. All isolates were classified as azole-sensitive Aspergillus fumigatus sensu stricto (AFSS) based on clinical cutoff points, particularly posaconazole, which exhibited superior antifungal activity. Our findings contribute to augmenting the limited information on the etiology and clinical antifungal sensitivity of IA in our country.

Actividad antimicrobiana de metabolitos secundarios de Aspergillus fumigatus sensu stricto sobre cepas clínicas de Staphylococcus aureus y Streptococcus pneumoniae / Antimicrobial activity of secondary metabolites of Aspergillus fumigatus sensu stricto on clinical strains of Staphylococcus aureus and Streptococcus pneumoniae

RESUMEN Introducción . La resistencia a los antibióticos de bacterias Gram positivas es un grave problema de salud pública donde algunas medidas paliativas pueden encontrarse en los principios antimicrobianos de hongos filamentosos. Objetivo . Evaluar la actividad antimicrobiana de metabolitos secundarios de un aislamiento clínico de Aspergillus fumigatus sobre cepas clínicas de Staphylococcus aureus y Streptococcus pneumoniae. Métodos . La fermentación líquida de A. fumigatus se realizó en un caldo líquido sulfato, papa y dextrosa, utilizando acetato de etilo para la extracción de metabolitos. Mediante la metodología de disco difusión se evaluó la actividad antimicrobiana considerada como un halo mayor de 6 mm. Resultados . Se obtuvo una media de 24,02 ± 2,51 mm y 23,62 ± 4,68 mm de halo de inhibición sobre Staphylococcus aureus sensible y resistente oxacilina, respectivamente. Para Streptococcus pneumoniae sensibles y no sensibles a penicilina las medias fueron de 25,82 ± 4,05 mm y 26,5 ± 5,39 mm, respectivamente. Conclusiones . El extracto crudo de A. fumigatus posee metabolitos secundarios de naturaleza alcaloide y esteroles insaturados con actividad antimicrobiana.

ABSTRACT Introduction . The antibiotic resistance of Gram positive bacteria is a serious public health problem where some palliative measures can be found in the antimicrobial principles of filamentous fungi. Objective. : To evaluate the antimicrobial activity of secondary metabolites of a clinical isolation of Aspergillus fumigatus on clinical strains of Staphylococcus aureus and Streptococcus pneumoniae. Methods . The liquid fermentation of A. fumigatus was carried out in a liquid broth sulfate, potato and dextrose; using ethyl acetate for the extraction of secondary metabolites. The antimicrobial activity considered as a halo greater than 6 mm was evaluated using the diffusion disk methodology. Results . A mean of 24,02 ± 2,51 mm and 23,62 ± 4,68 mm was obtained on sensitive and resistant Staphylococcus aureus, respectively. For Streptococcus pneumoniae sensitive and non-susceptible, the means were 25,82 ± 4,05 mm and 26,5 ± 5,39 mm, respectively. Conclusions . The crude extract of A. fumigatus has secondary metabolites of alkaloid nature and unsaturated sterols with antimicrobial activity.